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苏州金莱生物科技有限公司
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供应猪瘟病毒IgG抗体检测试剂盒 |
【产品名称】
通用名:猪瘟病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Classical Swine fever virus (ELISA)
【包装规格】 96T/盒
【原 理】
本试剂盒系由预包被猪瘟病毒E2重组蛋白的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清或血浆中猪瘟病毒特异性抗体。实验时,在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清,经温育后,若样品中含有猪瘟病毒的特异性抗体,则将与包被板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有特异性抗体。
【样品制备】 取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品短期可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
【样品稀释】 用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【试验操作方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照血清100μl;样品孔每孔加入稀释后的血清样本100μl;空白对照孔不加。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A)。 |
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